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polysciences公司23966-1新到現(xiàn)貨1g裝100瓶
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轉(zhuǎn)染試劑線性PEI溶液的配制(1mg/ml)
聚乙烯亞胺(Polyethylenimine,PEI)是聚乙烯亞胺是一種具有較高的陽(yáng)離子電荷密度的有機(jī)大分子,每相隔二個(gè)碳個(gè)原子,即每“第三個(gè)原子都是質(zhì)子化的氨基氮原子,使得聚合物網(wǎng)絡(luò)在任何pH下都能充當(dāng)有效的“質(zhì)子海綿”(proton sponge)體。PEI,可用作轉(zhuǎn)染試劑,它可以縮聚DNA分子形成顆粒并轉(zhuǎn)染真核細(xì)胞。有實(shí)驗(yàn)證明,分子量為25000的線性PEI即Polysciences 23966轉(zhuǎn)染效率zui高。
下面將主要介紹polysciences 線性PEI(#23966)的產(chǎn)品特性及其溶液的配制過(guò)程。
1. 產(chǎn)品特性:
產(chǎn)品名稱(chēng):線性聚乙烯亞胺(PEI)
CAS號(hào) | 9002-98-6,26913-06-4 | 分子式 | (CH2CH2NH)n | 分子量 | 25000 |
熔點(diǎn) | 73-75°C | 外觀 | 白色或黃色固體 | 結(jié)構(gòu)式 | |
溶解性 | 溶于熱水,低pH值的冷水,甲醇和乙醇;不溶于:苯,aether和丙酮 | 儲(chǔ)存 | 室溫 |
2. 溶液配制
此指導(dǎo)說(shuō)明書(shū)是經(jīng)polysciences公司研究,測(cè)試及其客戶(hù)反饋的后編寫(xiě)的。下面推薦一種簡(jiǎn)單適用而高效的方法,講述如何配制濃度為1mg/mL的轉(zhuǎn)染試劑的配制。
材料:
1g #23966、1L 純水(Milli-Q®純水,注射用水(WFI),或類(lèi)似的生物級(jí)水)、12 M鹽酸、10 M氫氧化鈉、一次性0.1-0.2µm PES真空無(wú)菌過(guò)濾器、無(wú)菌高聚乙烯或聚丙烯試劑瓶。
器材:
1 L 玻璃燒杯、1 L玻璃量筒、核準(zhǔn)pH計(jì)、2支1 mL塑料移液管、托盤(pán)、聚四氟乙烯(PTFE)攪拌棒、真空泵
配制過(guò)程:
1g #23966——900mL水溶解——攪拌、加熱(60-80°C)——加HCl調(diào)pH到2.0左右——蓋上燒杯,攪拌3h(直至粉末*溶解)——冷卻至室溫——加NaOH調(diào)pH到6.9-7.1——移液到量筒,加水補(bǔ)足至1L——真空過(guò)濾消毒——分裝,-20°C保存。
備注:加熱或加酸都有助于PEI溶解。當(dāng)然酸可能不用加那么多,詳細(xì)用量可試加一點(diǎn)攪拌看看,足夠溶解就行,不一定需要加到pH那么低。
試劑儲(chǔ)存:
冷凍部分溶液可在-20°C保存長(zhǎng)達(dá)一年;部分解凍的溶液可在4°C保存2周,不可反復(fù)凍融。
粉末儲(chǔ)存:
未開(kāi)封的粉末有效期兩年。可在室溫下保存直至使用。
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